激光共聚焦免疫熒光實驗

   激光掃描共聚焦熒光顯微鏡(laser scanning confocal microscopy,LSCM)是一種利用計算機、激光和圖像處理技術獲得生物樣品三維數據、目前先進的分子細胞生物學的分析儀器。它是在熒光顯微鏡成像的基礎上加裝了激光掃描裝置，利用計算機進行圖像處理，使用紫外光或激光激發熒光探針，從而得到細胞或組織內部微細結構的熒光圖像，觀察細胞的形態變化或生理功能的改變。激光共聚焦已成為形態學、分子細胞生物學、神經科學、藥理學和遺傳學等領域中新的有力研究工具。

 應用領域

在細胞及分子生物學基礎研究中的應用
激光掃描共聚焦顯微鏡應用照明針與檢測孔共軛成像，有效抑制了焦外模糊成像并可對標本各層分別成像，對活細胞行無損傷的“光學切片”這種功能也被形象的稱為“顯微 CT”。CLSM 還可以對貼壁的單個細胞或細胞群的胞內、胞外熒光作定位、定性、定量及實時分析，并對胞內成分如線粒體、內質網、高爾基體、DNA、RNA、Ca2+、Mg2+、Na+ 等的分布、含量等進行測定及動態觀察，使細胞結構和功能方面的研究達到分子水平。
在腫瘤和抗癌藥物篩選研究中的應用
普通顯微鏡及電子顯微鏡，僅能對腫瘤相關抗原進行定性分析，而 CLSM 則可對單標記或者多標記細胞、組織標本及活細胞進行重復性很好的熒光定量分析，從而對腫瘤細胞的抗原表達、細胞結構特征，抗腫瘤藥物的作用及機制等方面定量化  。
在血液病學和醫學免疫學研究中的應用
激光掃描共聚焦顯微鏡觀察免疫細胞和系統，如樹突狀細胞、單核-吞噬細胞系統、自然殺傷細胞、淋巴細胞時，在準確細胞定位的同時有效鑒定免疫細胞的性質。
在大腦和神經科學中的應用
激光掃描共聚焦顯微鏡分層掃描發現神經軸突的內部結構連續性好。用激光掃描共聚焦顯微鏡能觀察到腦干組織中神經軸突的正常走向，可排除在熒光顯微鏡下由此造成的一些病理假象  。并且激光掃描共聚焦顯微鏡能觀察神經軸突的三維結構，因此應用 CLSM 有可能觀察到普通光鏡下未能發現的神經組織的細微病變。
在眼科研究中的應用
利用激光掃描共聚焦顯微鏡可以觀察晶狀體，角膜、視網膜、虹膜和睫狀體的結構和病理變化。
在骨科研究領域中的應用
激光掃描共聚焦顯微鏡在骨科研究領域的應用現狀表明，CLSM在觀測骨細胞形態學研究、骨細胞特異性蛋白（骨鈣素）以及骨細胞之間的相互作用具有顯著的優勢。